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Flag抗體/Flag antibody|進口原裝Flag抗體/Flag antibody在免疫沉淀IP&免疫熒光IF中的應(yīng)用

2011/4/28 [1892]

Flag抗體/Flag antibody|進口原裝Flag抗體/Flag antibody在免疫沉淀IP&免疫熒光IF中的應(yīng)用


Flag標(biāo)簽系統(tǒng)是已被*的用于表達、純化以及檢測融合蛋白的表達系統(tǒng),廣泛應(yīng)用于Western blotting、免疫細胞組化、免疫共沉淀、流式細胞術(shù)、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個研究領(lǐng)域。Flag標(biāo)簽是一個與重組蛋白相融合的由8個親水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)組成的多肽片斷。FLAG標(biāo)簽只有8個氨基酸組成,因此它不會占據(jù)其他表位與結(jié)合域,避免導(dǎo)致融合蛋白的功能、分泌性以及轉(zhuǎn)運發(fā)生改變。由于它的親水性特點,F(xiàn)LAG標(biāo)簽傾向于定位在融合蛋白表面,因此更易與抗體結(jié)合以及被腸激酶酶解。

由于Flag標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,這一系統(tǒng)已用于各種細胞類型,包括細菌、酵母和哺乳細胞。由于Flag標(biāo)簽系統(tǒng)的純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號#E022060)可以用于檢測和Flag標(biāo)簽融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測Flag融合表達蛋白等。比如在免疫熒光IF的實驗里,同時配合EarthOx的Dylight 549熒光二抗,使用該抗體可以準(zhǔn)確的定位出Flag融合表達蛋白在細胞內(nèi)的位置(如圖紅色顯示部分)。另外,做融合表達分析前,通過免疫共沉淀技術(shù)獲得Flag融合表達蛋白也是非常重要的一步,因此選擇一個合適的、可用于免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)Flag標(biāo)簽抗體也是很必要的。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號#E022060)不僅能應(yīng)用于細胞內(nèi)定位的IF實驗,同樣還能應(yīng)用于IP實驗。1:200甚至更高的IP實驗稀釋比率,也說明了該抗體本身的具有很高的效價,同時,因為是單克隆抗體,因此特異性也很高。價所對應(yīng)的高稀釋比率也意味著。



 

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