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ELISA實(shí)驗(yàn)之入門小技巧

2025-07-15 [35]

對于ELISA實(shí)驗(yàn)新手們來說,一場實(shí)驗(yàn)下來還是有一定難度的,主要是因?yàn)檫€沒有掌握一些實(shí)驗(yàn)中的小技巧,掌握了實(shí)驗(yàn)技巧之后,做ELISA實(shí)驗(yàn)會(huì)容易很多。今天就為大家分享ELISA實(shí)驗(yàn)的入門小技巧,一起來看看吧!

1、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

2、合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。

3、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

4、要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。

5、樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。

6、為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。

7、未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。

8、ELISA實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放入孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗。

9、剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。 

10、每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。 

11、手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。

12、沒有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用純凈水配制溶液,切勿使用自來水。

13、在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭。

14、吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡。

以上就是ELISA實(shí)驗(yàn)的一些入門小技巧,掌握了這些小技巧,做ELISA實(shí)驗(yàn)就會(huì)容易很多。 

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