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ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領(lǐng)域。（一）原理ELISA是以免疫學反應為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，...

表觀遺傳改變可以定義為基因的遺傳性或獲得性改變，但是這種改變和DNA序列改變無關(guān)。DNA甲基化是zui為常見的表觀遺傳改變；啟動子或*外顯子CpG島中的甲基化改變將導致基因表達失活；組蛋白的化學修飾也可以作為表觀遺傳改變；組蛋白發(fā)生乙?；淖兊幕蛲ǔ１婚_啟。CpG島的異常甲基化是導致基因沉默和過度表達的zui主要的改變，常規(guī)的方法不能在全基因組水平上對甲基化進行檢查。表觀遺傳分析與基因芯片技術(shù)結(jié)合起來則可以高通量進行甲基化的定性、定量分析。目前建立了2種基于芯片的甲基化分析...

DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細胞的基礎(chǔ)上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質(zhì)變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過程中殘留的有機溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應,zui后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復合物,此復合物在高鹽（0.7mol/...

體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關(guān)鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手：1、從物品、用品消毒滅菌著手細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養(yǎng)...

固相萃取柱用于HPLC，GC，LC-MS/MS，GC-MS或其他技術(shù)分析樣品的制備。廣泛應用在藥物代謝及動力學、藥物分析、生物檢測、毒品和興奮劑檢測、食品安全分析、環(huán)境分析等領(lǐng)域。固相萃取柱應用的科學原理很簡單：一是讓待檢測的化合物通過固相萃取柱，而讓雜質(zhì)保留在固相萃取柱上，應用廣泛的實例包括C18，PSA，NH2固相萃取柱于農(nóng)殘分析；另一種策略就是讓雜質(zhì)穿過固相萃取柱，固相萃取柱有選擇性地濃縮和保留待檢測的化合物。固相萃取就是一種“開、關(guān)”原理，待檢測化合物要么*保留再洗脫...

熒光定量PCR因操作方便、運行速度快、實驗結(jié)果準確，受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術(shù)成熟的今天，也許對你來說，zui難得不是實驗技術(shù)上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算，更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對各種不同性能的產(chǎn)品，您又該如何選擇呢？認識熒光定量PCR的兩個誤區(qū)：誤區(qū)一：儀器通道越多越好隨著PCR技術(shù)的成熟運用，多重擴增越來越熱鬧，熒光定量PCR儀也不能幸免。從zu...